目前有太多的公司開始布局流式熒光免疫試劑的開發，不管是初創公司出于融資也好，還是老牌企業謀求新的出路也罷，總之看起來都躍躍欲試。那這是不是一個值得開拓的方向呢？接下來就以問答的形式來探討一下目前流式熒光試劑的一些開發和應用問題。
A 流式熒光相對于化學發光有什么優勢嗎？
流式熒光最核心的賣點就是單孔多聯檢。同樣都是10-50uL的血清，化學發光只可以出單項結果，流式熒光可以出幾十項結果。從所出結果的準確度方面考慮，流式熒光與化學發光幾乎沒有什么差別，而且理論上如果磁珠清洗液對于PE的保存十分有利，流式熒光的穩定性甚至是優于酶促發光的，也就是長時間的放置也不會影響最終的讀數。
B 單孔多聯檢的實現會給流式熒光省去很多的反應時間嗎？ 因為流式熒光和化學發光的反應過程幾乎是一致的，談到節省時間，應該不會有太大的優勢。我舉個例子，比如我們做的項目是抗核抗體16項，假如發光和流式熒光的反應過程耗時一樣，最終讀數的時候，發光是每隔10s讀取一個結果，單樣本需要耗時160s；流式是1min讀取16個結果，也就是60s；看起來每個樣本流式會節省100s，但是這通常構不成絕對的優勢，況且發光試劑的反應時長通常都是短于流式的。比如再舉個例子，細胞因子12項，我知道像是IL-6這種，羅氏的第一個樣本報告時間最快可以是20多分鐘，而大多數流式的反應時間就已經達到了1-2個小時，所以從結果的報告時長來看，流式卻又并不占優勢了。與其說是流式節省時間，倒不如說流式節省的是樣本和試劑倉的孔位，讓整個反應節省了儀器很多的空間，流程也更加簡化。
C 流式試劑相比于發光試劑，會節省成本嗎？
這個答案是肯定的。首先就是耗材的成本，單孔位可以完成多孔位的工作，反應杯和工作液都可以省出很多。尤其是抗原抗體的應用量，我舉個例子。比如對于發光，1mg磁珠按照50ug的蛋白標記量，最終做成10mL的工作液，如果按照50uL每人份的話，那么50ug蛋白可以做成200人份；對于流式，50ug蛋白可以標記10^7個磁珠，而這些磁珠可以做20000人份試劑！200vs20000，你可以體會到1mg蛋白用到天荒地老的樂趣了。
D 傳統的發光廠家可以直接跨越到流式熒光嗎？ 沒問題。對于全自動流式熒光免疫分析儀，和磁微粒發光儀器相比，可以說除了檢測模塊，沒有任何的區別。只要把最常用的2激光8通道的檢測模塊安裝到自己原有的發光儀器里面，就可以完全適用。而且，如果你是做發光比較成熟的企業，還可以做成流式和發光全自動一體機，這也是目前全自動儀器的進一步拓展，原有發光產品的應用不受限制。比如目前東方生物的產品Mplex-MA1600就是如此。但是，這樣一來儀器成本會相應增加，這也是企業需要考慮的因素。對于試劑研發而言，發光和流式也不會有什么差別，幾乎可以做到無縫銜接，唯一的區別就是磁珠。
E 編碼磁珠的成本高嗎？可不可以自己制備？有技術壁壘嗎？
目前做編碼磁珠的廠家是越來越多了，要相信上游原料廠家的嗅覺是非常靈敏的。像是為度、碧芯、納微、新縱科等等都在忙著新微球的制備。從各個廠家的研發進度來看，編碼磁珠的研發并不是一件難事，因此企業花點成本去搞微球的研發也是值得的，因為采購別人的微球目前來看成本還是略高的。
F 企業引進流式，哪些項目是必須要做的？真的有這個必要嗎？
流式平臺的引入，很有必要做的項目有細胞因子、自身免疫項目、過敏原檢測項目、腫瘤篩選、傳染病聯檢項目、心肌聯檢項目、肝纖項目等…其實完全可參考透景這個老大哥的企業動態，畢竟他們家引入流式平臺是國內很早的。但是反過來我們看一下透景的流式平臺的發展，好像并不是特別盡如人意。
像是細胞因子檢測，臨床意義都沒有特別明確；自身免疫檢測，歐蒙的客戶教育無人能敵；過敏原檢測，帝邁目前拿證一段時間了卻還沒有發力；傳染病項目，Elisa的地位基本上很難撼動；心肌聯合檢測，肝纖四項，發光甚至熒光POCT都夠用了…
另外就是幾十項聯合檢測的醫院收費問題也是關鍵，如果項目太少，發光就夠用；項目太多，又涉嫌捆綁銷售。所以整體來看，流式企業如何規劃自己的產品組合以迎合市場需求，可能會讓市場部的人費點心思。
G 目前拿證的全自動流式熒光分析儀多嗎？競爭力怎么樣？
以下是藥監局目前拿證的幾家全自動流式熒光發光免疫分析儀，目前來看做的企業并不是很多，如果定位要做，現在起步還并不晚。本人大致瀏覽了一下各個廠家的儀器，算是中規中矩吧，令人驚艷的目前還沒有，所以肯定還需要后來革命者。
最后總結一下：
1.相較于發光而言，目前流式熒光除了原材料方面比較節省，在儀器成本、檢測時間方面還沒顯現出非常凸出的優勢；
2.目前的流式全自動儀器并無技驚四座的地方，從化學發光到流式也基本上沒有技術壁壘，唯一有技術含量的就是編碼磁珠的開發，但隨著磁珠制備廠商的遍地開花，自己開發似乎也沒那么必要；
3.為了迎合流式平臺的特點，像是細胞因子，自身免疫等很多公司之前沒有涉及的項目就得重新立項和注冊，但是這些產品真正做的意義有多大，做出來市場競爭力如何，好像無從考量，只是單純地為了建設這個平臺而新增的工作；
4.想比于免疫印跡，基于編碼磁珠的流式熒光平臺確實給了多聯檢定量更多的可能性，但是這些項目的樣本含量和交叉反應性卻都限制了流式平臺的組合應用，比如CRP和SAA可以聯檢，CRP(0.5-200ug/ml)和PCT(0.1-100ng/ml)聯檢就顯得有些困難，線性區間差別太大。
5.目前流式平臺各個廠家都屬于剛起步階段，如果企業規劃里目標很明確就是要搞自免項目，那么目前搞一搞這個平臺相對來說還是比較有競爭力的，畢竟市場還未被挖掘的太厲害。但布局肯定是越快越好，比如帝邁的過敏原檢測，目前基于流式平臺有證的僅此一家，雖然撿了湖南省藥監局免臨床的一波福利，但是人家撿的恰到好處也是一種能力。目前雖然帝邁還沒有發力，只能說他們比較低調，還在認真打磨這個產品。一旦開始發力，抓住市場，后來者將非常被動。因為臨床費用就卡住了很多人的脖子，更別說后續的市場開拓了。
總而言之，要么就別做，做就要穩準狠，只要落下一步，就會被市場拋棄。
2023-8-25 |
